Анотація
Методики досліджень водних об’єктів шляхом проведення біотестування на ракоподібних Ceriodaphnia affinis включають у себе експерименти з вивчення та аналізу репродуктивних функцій тест-об’єктів, їх чутливості до зовнішніх подразників, які здатні призвести до порушенні різних функціональних процесів, передчасної загибелі особин. Залежно від вибору мети експерименту існує ряд різнопланових методик, які за своєю концепцією дають змогу визначити потрібний показник. В ході проведеного наукового експерименту було досліджено репродуктивну здатність Ceriodaphnia affinis при культивуванні в різних за жорсткістю середовищах (день отримання першої молоді, кількість молоді на 1 самку, виживаність в днях тощо). За результатами виконаного досліду було зроблено висновок, що модифіковане середовище, яке пропонується для культивування в пропорції «відстояна водна/дистильована вода – 1:2» не несе негативного впливу на репродуктивність ракоподібних. Використання дистильованої води під час розведення відстояної води до допустимих меж сприяє зниженню жорсткості у середовищі культивування і не спричиняє негативної дії на тест-об’єкт. Також можна додати, що урізноманітнення харчового раціону тест-об’єктів водоростями позитивно впливає на народжуваність організмів. Було досліджено чутливість ракоподібних Ceriodaphnia affinis до еталонної речовини K2Cr2O7 (дихромат калію) в стандартних та модифікованих умовах культивування. Модифіковане середовище (1:2) за 24 години більш стабільне по відношенню до інших модифікованих середовищ і сходиться за результатами зі стандартними умовами. Тобто, штучно створене середовище також підходить для досліджень з еталонними хімічними сполуками. Під час виконаних за 48 годин тестування досліджень, було попередньо встановлено, що модифіковане середовище (1:2) найбільше підходить до використання даного тест-об’єкту. Модифіковане середовище існування, яке було створене у ході експериментів, показало ряд переваг над середовищем, виготовленим згідно стандартних методик ДСТУ: була зменшена початкова жорсткість води, збільшена її живильна якість, що позитивно сказалася на продуктивності тест-об’єктів, покращена репродуктивна здатність представників ракоподібних. Усе це доводить той факт, що стандартні методики культивування тест-об’єктів не є оптимізованими та уніфікованими для різного роду експериментів, маючи в собі явні прогалини та шляхи подальшої модифікації. Відповідно цих фактів було доведено, що вдосконалення середовища існування організмів є перспективним шляхом розвитку технологій біотестування, так як у деяких випадках удосконалене модифіковане середовище культивування є зручнішим для використання в експериментальному плані, аніж стандартне синтетичне.
Посилання
Ratte H.T., Hammers-Wirtz M., Cleuvers M. (2003) Ecotoxicity testing / Bioindicators and biomonitors (B.A. Markert, A.M. Breure, H.G. Zechmeister, ed.), Chapter 7. – Elsevier Science Ltd., pр. 221–256.
Hernando M.D., Malato O., Farré M., FernandezAlba A.R., Barceló D. (2006) Application of ring study: Water toxicity determinations by bioluminescence assay with Vibrio fischeri. Talanta, V. 69. I. 2, pp. 370–376.
OECD. Guideline for the testing of chemicals 202: Daphnia sp., acute immobilisation test. Adopted 13 April 2004, Paris (FR), 12 p.
OECD. Guideline for the testing of chemicals 201: Freshwater alga and cyanobacteria, growth inhibition test. Adopted 28 July 2011, Paris (FR), 25 p.
OECD. Guideline for the testing of chemicals 211: Daphnia magna reproduction test. Adopted 02 Oct 2012, Paris (FR), 20 p.
OECD. Guideline for the testing of chemicals 235: Chironomus sp., acute immobilisation test. Adopted 28 July 2011, Paris (FR), 16 p.
Григорьев Ю.С., Шашкова Т.Л., Стравинскене Е.С. Биотестирование в системе экологического мониторинга качества вод: решаемые задачи и условия, обеспечивающие получение воспроизводимых результатов / Матер. Всерос. конф. по водной экотоксикологии: Антропогенное влияние на водные организмы и экосистемы (Борок, 28 октября – 1 ноября 2014 г.). 2014. Т. 1. С. 130–132.
US EPA. Methods for Measuring the Acute Toxicity of Effluents and Receiving Waters to Freshwater and Marine Organisms, 4th Edition. EPA/600/4/-90/027F, 1994, 28 p.
Федосеева Е.В., Сапункова Н.Ю., Терехова В.А. Практическая экотоксикология: оценка чувствительности биотест-культур : Учебное пособие / Под ред. В.А. Тереховой. Москва : ГЕОС, 2016. С. 54.
ISO 6341:2012. Water quality – Determination of the inhibition of the mobility of Daphnia magna Straus (Cladocera, Crustacea) – Acute toxicity test. – 22 p.
ДСТУ 4174:2003 Якість води. Визначення хронічної токсичності хімічних речовин та води на Daphnia magna Straus та Ceriodaphnia affinis Lilljeborg (Cladosera, Crustacea) (ISO 10706:2000, MOD). [Чинний від 2004-07-01]. Вид. офіц. Київ : Держспоживстандарт України, 2004.
Крайнюков О.М., Якушева А.В. Етапи встановлення екологічних стандартів якості в країнах ЄС : зб. наук. стат., (м. Харків, 12 квіт. 2018 р.). Харків, 2018. С. 90–91.
Ratte, H.T., Hammers-Wirtz, M., Cleuvers, M. (2003). Ecotoxicity testing / Bioindicators and biomonitors (B.A. Markert, A.M. Breure, H.G. Zechmeister, ed.), Chapter 7. – Elsevier Science Ltd., pр. 221–256.
Hernando, M.D., Malato, O., Farré, M., FernandezAlba, A.R., Barceló, D. (2006). Application of ring study: Water toxicity determinations by bioluminescence assay with Vibrio fischeri. Talanta, V. 69. I. 2, pp. 370–376.
OECD. Guideline for the testing of chemicals 202: Daphnia sp., acute immobilisation test. Adopted 13 April 2004, Paris (FR), 12 p.
OECD. Guideline for the testing of chemicals 201: Freshwater alga and cyanobacteria, growth inhibition test. Adopted 28 July 2011, Paris (FR), 25 p.
OECD. Guideline for the testing of chemicals 211: Daphnia magna reproduction test. Adopted 02 Oct 2012, Paris (FR), 20 p.
OECD. Guideline for the testing of chemicals 235: Chironomus sp., acute immobilisation test. Adopted 28 July 2011, Paris (FR), 16 p.
Grigoryev, Yu.S., Shashkova, T.L., & Stravinskene, E.S. (2014). Biotestirovaniye v sisteme ekologicheskogo monitoringa kachestva vod: reshayemyye zadachi i usloviya, obespechivayushchiye polucheniye vosproizvodimykh rezul'tatov [Biotesting in the system of environmental monitoring of water quality: solvable tasks and conditions ensuring reproducible results] Mater. Vseros. conf. on aquatic ecotoxicology: Anthropogenic impact on aquatic organisms and ecosystems (Borok, October 28 – November 1, 2014). T. 1, pp. 130–132. (in Russian)
US EPA. Methods for Measuring the Acute Toxicity of Effluents and Receiving Waters to Freshwater and Marine Organisms, 4th Edition. EPA/600/4/-90/027F, 1994, 28 p.
Fedoseeva, E.V., Sapunkova, N.Yu., Terekhova, V.A. (2016). Prakticheskaya ekotoksikologiya: otsenka chuvstvitel'nosti biotest-kul'tur [Practical ecotoxicology: assessment of the sensitivity of biotest cultures] Textbook / Ed. V.A. Terekhova. Moskva: GEOS, p. 54. (in Russian)
ISO 6341:2012. Water quality – Determination of the inhibition of the mobility of Daphnia magna Straus (Cladocera, Crustacea) – Acute toxicity test, 22 p.
DSTU 4174: 2003 Yakistʹ vody. Vyznachennya khronichnoyi toksychnosti khimichnykh rechovyn ta vody na Daphnia magna Straus ta Ceriodaphnia affinis Lilljeborg (Cladosera, Crustacea) [Water quality. Determination of chronic toxicity of chemicals and water on Daphnia magna Straus and Ceriodaphnia affinis Lilljeborg] (Cladosera, Crustacea) (ISO 10706: 2000, MOD). [Valid from 2004-07-01]. View. ofits. Kyiv: Derzhspozhyvstandart Ukrainy, 2004. (in Ukrainian)
Krainyukov, O.M., & Yakusheva, A.V. (2018). Etapy vstanovlennya ekolohichnykh standartiv yakosti v krayinakh ES [Stages of establishing environmental quality standards in EU countries]. Coll. Science. stat., (Kharkiv, April 12, 2018). Kharkiv, pp. 90–91. (in Ukrainian)